Bei der Durchführung eines blau-weißen Screens enthalten weiße Bakterienkolonien?
Bei der Durchführung eines blau-weißen Screens enthalten weiße Bakterienkolonien?

Video: Bei der Durchführung eines blau-weißen Screens enthalten weiße Bakterienkolonien?

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Video: Blau-Weiß-Selektion | Transgene Bakterien | Biologie einfach erklärt 2024, November
Anonim

Umgekehrt ist die weiße Kolonien kann X-Gal nicht metabolisieren, um die Blau Farbe, da sie keine funktionelle β-Galactosidase produzieren, nachdem sie das Plasmid aufgenommen haben, das die inserierte DNA trägt und das lacZ-α-Gen zerstört. Diese weiße Kolonien enthalten die rekombinante Bakterien und sollte ausgewählt werden (Abbildung 1).

Enthalten also alle weißen und blauen Kolonien ein Plasmid?

Die blaue Kolonien enthalten „selbst“religiös Plasmide das tun keine DNA-Inserts aufweisen, die das lac-Z-Gen unterbrechen. Weiße Kolonien bestehen aus Bakterien, die Plasmide die DNA-Insert-Fragmente aufweisen, die das lac-Z-Gen unterbrechen. Die Auswahl erfolgt auf Ampicillin enthält Mittel.

Und was ist der Zweck der Blau-Weiß-Rasterung? Die Blau – Weiß Bildschirm ist ein Screening Technik, die den schnellen und bequemen Nachweis rekombinanter Bakterien in vektorbasierten molekularen Klonierungsexperimenten ermöglicht. DNA von Interesse wird in einen Vektor ligiert.

Was ist in diesem Zusammenhang ein Blau-Weiß-Kolonie-Screening?

Die Blau - weißer Bildschirm ist ein Screening Technik, die den Nachweis erfolgreicher Ligationen bei der vektorbasierten Genklonierung ermöglicht. Die interessierende DNA wird in einen Vektor ligiert. Wenn die Ligation erfolgreich war, werden die Bakterien Kolonie wird sein Weiß ; wenn nicht, die Kolonie wird sein Blau.

Warum sind manche Kolonien blau und andere weiß?

Irgendein Kolonie das Plasmid (und damit das funktionierende β-Galactosidase-Gen) enthält, wird Blau , ein Ergebnis der β-Galactosidase-Aktivität. Dies wird als α-Komplementation bezeichnet. Das Insert zerstörte das β-Galactosidase-Gen, und daher sind diese Kolonien bleiben übrig Weiß.

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